Новости
27.03.2024 27.03.2024 26.03.2024 |
Методы исследования морфологии фитопатогенных бактерий31.01.2014
После посева кашицы на твердые питательные среды развивающиеся на них бактерии образуют видимые невооруженным глазом скопления, называющиеся колониями и представляющие собой потомство одной или нескольких клеток. Внешние особенности этих колоний, их структура и консистенция имеют большое значение для диагностики бактерий. У каждого вида бактерий свойства колоний определяются внутренними особенностями организма, а также особенностями питательной среды, на которой развивается данная колония. Структуру колоний изучают под лупой или микроскопом со слабым увеличением, сухой системой при суженной диафрагме или несколько опущенном конденсоре. Рассматривать колонии надо в чашке, помещенной на столике вверх дном. Передвигая ее, отмечают колонии различной структуры – гомогенной, гиалиновой, зернистой, аморфной, неоднородной, различающейся в центре и по периферии. Таким образом, структура бактериальных колоний чрезвычайно разнообразна. По ней отличаются не только различные виды бактерий, но нередко штаммы одного и того же вида образуют колонии различного типа. Чаще всего у одного и того же вида бактерий различают s (гладкие) и r (шероховатые) колонии бактерий. Эти типы колоний характерны для большинства бактерий. Гладкие колонии бывают круглыми, выпуклыми, сочными, влажными, просвечивающимися в проходящем свете, с гладкой блестящей поверхностью и с гладким краем. Шероховатые колонии характеризуются тем, что они становятся менее прозрачными, распластанными, с поверхностью в различной степени шероховатой и зазубренным или волнистым краем, имеют неправильную форму. Наблюдается также образование промежуточных форм, характеризующихся непрозрачными гладкими колониями, называемыми 0-колониями. Изменение морфологии колоний происходит по формуле: S = 0 = r. Цвет колоний очень варьирует. Чаще всего они бывают прозрачными, просвечивающимися, полупрозрачными и непрозрачными, а также бесцветными, иногда белыми. Однако встречаются колонии серые, желтые, розовые и других цветов. Определенный интерес представляет изучение юных колоний бактерий. В литературе высказывается вполне определенное мнение, что микроструктура юных колоний настолько характерна, что может служить опознавательным признаком для отдельных видов бактерий. Для изучения юных колоний бактерий применяется метод агар-микроскопии. Заключается он в том, что одну-две капли односуточной культуры возбудителя высевают в чашки Петри на твердые питательные среды и помещают в термостат при оптимальной температуре с целью получения отдельных колоний. Через 2, 3, 6, 12, 18, 24 и 36 час инкубации производят просмотр нарастающих колоний при небольшом увеличении. Проведенные наблюдения показали, что колонии наиболее удобны для просмотра в 24-часовом возрасте. К этому времени у них достаточно четко оформлены все морфологические признаки, ясно видно расположение бактериальных клеток. При изучении фитопатогенных бактерий метод агар-Микроскопии почти не применялся. Он был применен А. Калиненко (1933) при изучении им колоний X. necrosis. Е.С. Гуринович (1949) описала микроструктуру колоний X. malvacearum.X. саmpestris и X. phaseoli. По ее наблюдениям, колонии X. phaseoli были менее слизистые, чем X. campestris, и отличались менее характерным размещением клеток. Таким образом, метод агар- микроскопии может дать дополнительные данные к характеристике фитопатогенных бактерий. |