Приготовление бактериальных взвесей по оптическому стандарту

03.02.2014

При проведении серологических исследований и некоторых других микробиологических работ (с антибиотиками, бактериофагом и др.) необходимо иметь определенное количество микробных тел в 1 мл. Для этой цели готовят взвесь бактерий, пользуясь бактериальным стандартом мутности, выпускаемым Государственным контрольным институтом вакцин и сывороток им. Л.А. Тарасевича. Указанный стандарт предназначен для определения концентрации микробных клеток в 1 мл исследуемой бактериальной взвеси.
Выпускаемый стандарт состоит из четырех запаянных пробирок – эталонов, содержащих измельченное стекло и различающихся степенью мутности. В качестве единицы мутности условно принята мутность взвеси живых тифозных бактерий в концентрации 100 млн. микробных тел в 1 мл. Цифры 5, 9, 10, 11 на пробирках-эталонах обозначают количество единиц мутности в каждой отдельной пробирке. Таким образом, эталон
5 соответствует 500 млн. микробных тел в 1 мл, 9–900 млн., 10–1 млрд. и 11–1,1 млрд.
В комплект бактериального стандарта входит также таблица с различными шрифтами и две пробирки, диаметр, толщина стенок и цвет которых соответствуют пробиркам-эталонам. Микробную взвесь готовят, используя бактериальную культуру в возрасте 18–24 час. Более старые культуры не пригодны, так как содержат большое количество мертвых клеток. Культуру, выросшую на косом агаре, заливают физиологическим раствором или стерильной водопроводной водой и тщательно взбалтывают, затем часть взвеси переносят в пробирку, соответствующую эталонной. Полученную взвесь сравнивают по степени мутности с эталонной пробиркой при дневном освещении и падающем свете, подложив под обе пробирки таблицу со шрифтами.