Новости

Люминесцентно-микроскопическая аппаратура

10.01.2014

В состав люминесцентно-микроскопической аппаратуры входят: источники возбуждающего света, светофильтры, опак-иллюминатор, микроскоп и дополнительные устройства (конденсор темного поля, фазово-контрастное устройство, фотонасадки и др.).
Наиболее простая установка для люминесцентной микроскопии может быть составлена из обычного биологического микроскопа (МБИ-1), двух светофильтров (сине-фиолетового и желтого) и осветителя для микроскопа с лампой накаливания или шариковой кварцевой лампой сверхвысокого давления (СВДШ).
В настоящее время нашей промышленностью для люминесцентно-микроскопических исследований изготовляется ряд совершенных приборов - люминесцентное устройство ОИ-17, специальный люминесцентный осветитель ОСЛ-1, люминесцентные микроскопы: МЛ-1, МЛ-2, МЛ-3, а также ультрафиолетовый микроскоп МУФ-3м.
Из указанных приборов наиболее широко применяются люминесцентное устройство ОИ-17 и люминесцентный микроскоп МЛ-2.
В основе принципиальной схемы всех установок для люминесцентной микроскопии лежит явление фотолюминесценции микроскопических структур объекта в результате облучения препарата ультрафиолетовыми лучами либо сине-фиолетовым светом. В обоих случаях возникает люминесценция в цветовой гамме всего или в большей части видимого спектра, что дает цветное светящееся изображение. Данный метод люминесцентной микроскопии в настоящее время применяется преимущественно для изучения первичной, так называемой естественной флуоресценции микробиологических препаратов.
В тех случаях, когда объект сам не люминесцирует, его подкрашивают специальными красителями-флуорохромами, после чего нефлуоресцирующие компоненты препарата начинают проявлять явление фотолюминесценции, носящей название вторичной, или наведенной люминесценции. В качестве красителей используются синтетические флуорохромы - акридин оранжевый, аурамин, корифосфин и химиотерапевтические препараты - акрихин, трипафлавин, риванол и др. Особенно важным является метод прижизненного флуорохромирования. Окраску бактерий производят добавлением к их взвеси сильно разведенных растворов красителей (1 : 10000-1 : 100000 и более), а затем рассматривают их под люминесцентным микроскопом.
Методика флуорохромирования убитых клеток фиксированных мазков также является несложной. Бактерии, снятые с питательной среды, промывают два-три раза стерильной водопроводной водой, наносят на предметное стекло, фиксируют на пламени или химическими веществами (этиловым или метиловым спиртом, 10%-ным водным раствором формалина, смесью Никифорова, Карнуа и др.). На фиксированные, отмытые и высушенные препараты наносят каплю флуорохрома на 1-10 мин в зависимости от применяемого флуорохрома и его концентрации, что в каждом отдельном случае устанавливается опытным путем. Затем препарат осторожно промывают водой, удаляя избыток флуорохрома, высушивают и исследуют.
Люминесцентное устройство ОИ-17 (рис. 4). Люминесцентное устройство ОИ-17 состоит из опак-иллюминатора со светоделительной пластинкой Брумберга-Крыловой, селективно отбрасывающей на объект короткие синие и ультрафиолетовые лучи и пропускающей остальные, люминесцентного осветителя ОИ-18 со ртутной лампой СВД-120 А (источником света, возбуждающим люминесценцию) и набора светофильтров (входных, выделяющих ультрафиолетовые лучи определенной длины, и запирающих, предназначенных для поглощения синих лучей, засвечивающих поле зрения микроскопа, или для защиты глаза от действия возбуждающих лучей и вспомогательных фильтров - теплозащитных, поглощающих тепловые лучи, и срезающих ультрафиолетовое излучение).

Люминесцентно-микроскопическая аппаратура

Люминесцентное устройство для микроскопических исследований применяется совместно с биологическими микроскопами - МБИ-1, МБР-1, МБИ-3, МБР-3, МБД-1 либо со стереоскопическими микроскопами - МБС-1 и МБС-2 в том случае, если нет необходимости проведения детальных исследований.
Наблюдать объекты в свете их люминесценции, возбуждаемой лучами с длиной волны 365- 400 ммк, можно при освещении объектов сверху через опак-иллюминатор и объектив и снизу через конденсор микроскопа. При работе с опак-иллюминатором ОИ-17 для микрофотографии пользуются любым видом микрофотонасадки.
Люминесцентный микроскоп МЛ-2 (рис. 5). Люминесцентный микроскоп МЛ-2 предназначен для изучения микробиологических, гистологических препаратов, выявления и диагностики микроорганизмов, установления локализации и функционального состояния отдельных клеточных структур и ряда других исследований. Наблюдения ведутся в свете люминесценции, возбуждаемой сине-фиолетовыми участками спектра, как и ультрафиолетовыми лучами с длиной волны до 360 ммк.
Люминесцентно-микроскопическая аппаратура

МЛ-2 снабжен различными дополнительными приспособлениями, что позволяет вести исследования при освещении объективов сверху через объектив. Используя конденсор темного поля ОИ-13 или фазово-контрастное устройство КФ-4, входящие в комплект прибора, можно освещать объекты и снизу.
Микроскоп позволяет производить исследования объектов в видимой части спектра в проходящем и отраженном свете в темном поле. Он дает также возможность фотографировать изучаемые препараты на кадр размером 24х36 мм при помощи фотонасадки МНФ-10, входящей в комплект прибора.
Подробное изложение основных частей МЛ-2, его оптической системы, конструкции принципа действия и методика работы с ним приводятся в описании, приложенном к данному микроскопу.


Имя:*
E-Mail:
Комментарий: